摘要：本研究旨在联合运用阳离子多聚物PEI和方波电穿孔两种不同机制的转染手段，以期克服精子难转染的问题。通过形成稳定复合物、吸附细胞表面、胞吞作用进入细胞、内涵体逃逸与DNA释放等步骤，实现了对小鼠精子的高效核内转染，为精子载体法在大动物中的应用提供了成功的模式。引言精子载体法是一种以精子为载体，利用精子与卵子结合的过程将外源基因带入受精卵中形成转基因动物的方法。该法无需专门的大型设备和技术，简单便捷，应用广泛，尤其对于猪、牛、羊等大动物更有方法学上的优势，科学界一直寄厚望于...

摘要：本研究通过电穿孔技术将人端粒酶逆转录酶（hTERT）转染至许旺细胞，旨在提升其增殖能力和抗衰老性能，进而为神经损伤修复提供新型细胞资源。实验结果显示，hTERT转染显著增强了许旺细胞的增殖能力和端粒酶活性，优化了细胞形态。本研究为神经损伤修复策略提供了理论基础和技术支持。引言：神经损伤疾病严重影响患者的生活质量，寻找有效的修复策略显得尤为关键。许旺细胞（又称雪旺细胞）作为周围神经损伤修复中的重要细胞，具有分泌多种神经营养因子、引导轴突生长及髓鞘化的功能。然而，许旺细胞在...

摘要：本研究旨在建立一种高效的人外周血单核细胞分离及电穿孔转染方法。通过基于HISTOPAQUE的密度梯度离心及抗体标记纯化方法分离单核细胞，并使用某品牌电穿孔仪进行转染。结果显示，单核细胞纯度高达89.95%，转染效率为60%～70%。该方法为后续单核细胞功能研究提供了可靠的技术支持。引言人外周血单核细胞作为免疫系统的重要组成部分，在感染、炎症及免疫反应中发挥关键作用。为了深入研究单核细胞的功能及其在各种疾病中的作用机制，首先需要建立高效的单核细胞分离和转染方法。单核细胞的...

摘要：本研究旨在建立一种高效电穿孔介导siRNA转染原代软骨细胞的方法，以实现基因沉默效果并维持较高的细胞存活率。通过优化电穿孔参数和使用高效电转缓冲液，成功实现了siRNA的高效转染，为基因功能研究和疾病机制探讨提供了有力工具。引言在生命科学研究领域，RNA干扰（RNAi）技术已成为研究基因功能和疾病机制的重要工具。小干扰RNA（siRNA）作为RNAi的关键效应分子，能够特异性地沉默目标基因的表达。然而，由于细胞类型的多样性和siRNA的自身特性，siRNA的转染过程面临...

摘要：本文详细探讨了裸质粒转染细胞的可行性，通过构建真核载体PCDNA3.1(+)-EGFP与pEGFP-C3的绿色荧光蛋白表达系统，验证了裸质粒直接转染细胞的效率及其影响因素。实验结果表明，真核载体可直接通过细胞膜进入细胞并表达绿色荧光，但其转染效率与质粒的结构和浓度密切相关。本研究为基因治疗及基因功能研究提供了新的思路和方法。引言基因转染是现代分子生物学研究中的一项基础且关键的技术，广泛应用于基因表达研究、基因功能分析、蛋白质生产以及疫苗开发等领域。传统的基因转染方法多采...

摘要：本文旨在通过基因表达谱芯片技术筛选能被β干扰素（IFN-β）反式调节的靶基因，并研究其生物学功能及其机制。实验构建了IFN-β的真核表达载体，转染HepG2细胞后，利用基因芯片技术检测到70条差异表达基因。这些发现为深入探索IFN-β的调节机制及其生物学功能提供了新的依据。引言β干扰素（IFN-β）作为一种重要的细胞因子，在抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等方面发挥着重要作用。IFN-β能够调节多种细胞的基因表达，进而影响细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程。然而，IFN-β的具...

摘要：本文详细阐述了阳离子多聚体DNA复合物在基因转染表达中的特性与价值，构建了高效的基因转化体系。通过采用聚乙烯亚胺（PEI）等阳离子多聚体与DNA结合，形成稳定的复合物，实现了高转染效率和低细胞毒性。本文还探讨了该方法的实验材料、方法、结果及创新应用前景，为基因治疗提供了新思路。引言基因治疗作为现代分子生物学技术进步的产物，在治疗多种疾病中展现出巨大潜力，包括遗传性疾病、感染性疾病、癌症、心血管疾病、神经性疾病和自身免疫性疾病等。然而，基因治疗的关键在于安全有效的基因传递...

摘要本文介绍了一种阳性转染细胞亲和分选方法及试剂盒，该方法通过构建一种基于细胞膜表面定位荧光蛋白标签的亲和分选系统，实现了对转染阳性细胞的高效分选。实验结果表明，该系统具有操作简便、细胞损伤小、适用性广等优点，为基因功能研究提供了有力工具。引言细胞转染技术是现代分子生物学研究中的一种重要技术手段，它可以将外源DNA、RNA或其他生物大分子导入细胞内，从而实现对细胞功能的研究和调控。然而，在难转染细胞中，如淋巴瘤/白血病细胞以及原代细胞，转染效率往往较低，这限制了这些细胞为基础...